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寧夏基因敲除動物模型手術

來源: 發布時間:2025-10-15

所述外顯子序列為第3外顯子序列。進一步地,在本發明的一些實施方案中,利用cre-loxp基因敲除技術敲除gm20541基因上的第3外顯子序列。上述敲除策略是采用cre-loxp敲除技術敲除gm20541基因。但在其他的實施例中,實現基因敲除的技術手段有很多,例如crispr/cas9技術、人工核酸酶介導的鋅指核酸酶技術(zinc-fingernucleases,zfn)、轉錄因子樣效應物核酸酶技術(transceriptionactivator-likeeffectornucleases,talen)等。因此,在其他的實施例中采用crispr/cas9技術或其他的技術手段敲除gm20541基因,也是屬于本發明的保護范圍。進一步地,在本發明的一些實施方案中,所述目標動物為哺乳動物。進一步地,在本發明的一些實施方案中,所述哺乳動物選自小鼠、大鼠、狗、豬、猴以及猿中的任意一種。需要說明是,本發明所述的目標動物并不限于上述的動物,其他類型的哺乳動物也是可行,無論選用何種動物,只要是具有gm20541基因或其同源基因的動物,均可作為本發明所述構建方法中的目標動物,在其前體細胞中敲除gm20541基因,使其表現出視網膜色素變性性疾病特征,作為視網膜色素變性疾病模型,這也是屬于本發明的保護范圍。第二方面。脂多糖(LPS)聯合煙熏法致慢性阻塞性肺部疾病小鼠模型。寧夏基因敲除動物模型手術

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特發性肺纖維化(IPF)小鼠模型建立【方法】1、BALB/c小鼠麻醉,6-8周齡,體重20~25g,仰臥固定于實驗臺上,頸部去毛后酒精消毒,切開皮膚,逐層暴露氣管;2、將1mL注射器經兩氣管軟骨環間隙朝向心端刺入氣管,回抽無阻力;3、注入博萊霉素(約4~5mg/kg)再向氣管內注入~3次,使藥物在肺部分布均勻;4、以大鼠身體長軸為中心,正反快速旋轉鼠板1~2分鐘。縫合皮膚,局部聚維酮碘消毒(或用青霉素消毒)防止,室溫保持在24~25℃,待動物自然清醒后置籠內常規飼養。肺纖維化模型發展時間:2周可見肺系數(肺重/體重×100%)、羥脯氨酸含量明顯升高。顯微鏡下可見炎癥細胞浸潤,以淋巴細胞、單核吞噬細胞為主,并有肺泡壁增厚、成纖維細胞增生等Ⅱ級肺泡炎表現。4周可見肺間質內有大量散在綠染的膠原纖維,肺泡結構破壞,見有許多纖維細胞等Ⅲ級肺間質纖維化病變。大鼠模型病理組織學與病理生理學改變與人類肺間質纖維化相似。其病變早期表現為滲出性肺泡炎,炎癥細胞在病變處聚集增多。晚期為肺間質纖維化,間質細胞增生,基質膠原聚集取代正常的肺組織結構?!緳z測】組織病理切片HE染色。寧夏豚鼠動物模型飼養動物模型的優越性主要表現在以下幾下方面。

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酒精性肝病(AH)大鼠模型建模方法【方法】1、正常組大鼠自由飲水。2、酒精性脂肪肝(alcoholicfattyliverdisease,AFL)模型組大鼠自由飲用酒精飲料,其酒精濃度從5%開始,每個濃度維持一周,依次改為10%、15%、20%、25%、30%、35%至40%,以40%濃度持續至12周。3、在實驗過程中,各組大鼠均給以普通顆粒飼料,共持續為12周。4、第12,動物禁食12h,稱重,下腔靜脈取血處死,血液離心取上清備用。【檢測】1、生化指標檢測檢測ALT、AST、TC、TG、FFA、LDL-C、HDL-C和血糖的含量。2、組織病理學酒精性脂肪肝模型組大鼠肝臟體積增大,明顯腫脹,包膜緊張,邊緣圓鈍,呈奶黃色,切面油膩,腹腔內尤以有腹膜后脂肪堆積明顯。HE染色顯示,正常組肝臟內無明顯脂肪變性,肝小葉結構正常,肝細胞索圍繞靜脈呈放射排列。模型組肝臟彌漫大量脂肪變性,細胞體積增大,呈氣球樣變。3、標志因子水平ELISA法測定血清中TNF-α和ApoB的含量。

本發明涉及醫學工程技術領域,具體而言,涉及一種利用gm20541基因構建視網膜色素變性疾病模型的方法和應用。背景技術:視網膜色素變性(retinitispigmentosa,rp)是一組視網膜光感受器異常導致的遺傳性致盲眼底病,在全世界的發病率約為1/3000~1/4000,而在中國人群的發病率可達1/3500,由于我國人口眾多,rp患者可達三十萬之眾,給家庭和社會帶來了沉重的負擔。目前針對rp的診斷和面臨許多困難,尚無有效的手段,這主要歸因于其在臨床表型和遺傳上具有高度的異質性,針對其病理機制系統研究不足。典型的rp患者早由于視桿細胞功能缺陷而出現夜盲和視野狹窄,逐步發展為管狀視野,直至失明;眼底檢查可見視網膜色素沉著。在病理學方面,典型的rp主要影響視桿細胞,造成視桿細胞死亡并繼發視錐細胞死亡,主要表現為光感受器受損、變性,視網膜外核層逐漸變薄直至消失,視網膜外網層及其他相關細胞層出現相應病理改變。此外,由于rp在臨床表型和遺傳模式上均具有高度的異質性,導致許多的rp致病機制尚不清楚,這為rp疾病的臨床診斷帶來極大困難,因此針對rp疾病的致病機制研究迫在眉睫。而目前,缺乏相應的rp疾病模型。IgA腎病小鼠模型IgA 腎病是常見的原發性腎小球疾病,約占原發性腎小球疾病的 1/3。

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堿燒傷致角膜損傷大鼠模型一、服務信息1、動物模型名稱:堿燒傷致角膜損傷大鼠模型2、實驗動物種屬:SD大鼠3、實驗動物性別:雌雄不限4、實驗動物年齡:成年5、實驗動物體重:160-200g6、實驗動物環境:SPF級二、服務項目服務編號服務內容服務周期價錢DH2020堿燒傷致角膜損傷大鼠模型1周詢價1、實驗方法:氫氧化鈉致大鼠角膜化學性損傷。大鼠用戊巴比妥鈉腹腔注射麻醉,用干棉棒拭去結膜囊多余液體,將統一規格直徑3mm的圓形濾紙片浸入1mol/LNaOH溶液中20s,飽和后取出置于干燥濾紙上1秒以吸去過多的堿液,將濾紙片貼敷于大鼠右眼角膜90s后移去,立即用滅菌水沖洗結膜囊及角膜2min。2、檢測標準:肉眼或裂隙燈下觀察到角膜有損傷。三、交付標準:1.提供動物模型構建過程中的原始實驗記錄及數據圖片。2.根據要求提供構建成功的模型動物或相關組織材料。四、服務項目說明:1、如有特殊要求,請另詢價。2、雙方簽訂合同后,收取70%首付后啟動實驗。人類疾病的動物模型是指各種醫學科學研究中建立的具有人類疾病模擬表現的動物。寧夏腦定位動物模型培養

通過截斷大鼠面部神經致面癱模型的建立。寧夏基因敲除動物模型手術

其也是可以作為視網膜色素變性疾病模型的。以上所述為本發明的實施例而已,并不用于限制本發明,對于本領域的技術人員來說,本發明可以有各種更改和變化。凡在本發明的精神和原則之內,所作的任何修改、等同替換、改進等,均應包含在本發明的保護范圍之內。sequencelisting四川省人民醫院利用gm20541基因構建視網膜色素變性疾病模型的方法和應用111406dna人工序列1gaatgcagtgacctatgatgatgtgtgtgtgaacttcactctggaagaatggactttact60ggatccttcacagaagagtctctacagagatgtgatgcaggaaacctacaggaatctcac120tgctataggctacaattgggaagatgacaatattgaagactattttcaaagttctagaag180acatggaaggcatgaaagaaatcatagtggagagaaaccttatgcttgtaaccaatgtga240taaagccttttcatgtcatcatagtctccaaatacataaaagaagacatactggagagaa300actctatgaatgtaaccgttgtaataaaggctttccatatcccagtgctctacaaataca360taaaaggatacacagtggagagaaaccctatgaatgtaaacaatgtggtaaagcctttgc420atgtcacagttctcttcaaaggcatgaaagaatacatactggtgagaaaccttatgaatg480tagccaatgtggtaaagcctttacacatcaaaagagtctccaaatacataaaagaactca540cagtggagaaaaaccatatgggtgtagtcagtgtggaaaagactttgtaagtcagagtcg600tcttctagaacataaaaggacacatactgga。寧夏基因敲除動物模型手術

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