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黑龍江裸鼠原代細(xì)胞實(shí)驗(yàn)

來(lái)源: 發(fā)布時(shí)間:2025-10-15

具體實(shí)施方式以下結(jié)合附圖和具體實(shí)施例,對(duì)本實(shí)用新型進(jìn)行詳細(xì)說(shuō)明。如圖1至圖5所示,一種新型原代細(xì)胞培養(yǎng)箱,包括若干個(gè)用于存放細(xì)胞培養(yǎng)皿的內(nèi)箱盒2、及用于存放所述內(nèi)箱盒的外箱體1,所述外箱體1內(nèi)設(shè)有若干列中空的矩形槽11,各所述矩形槽11的兩側(cè)分別設(shè)有若干層對(duì)稱的滑槽111,若干層所述滑槽111由上至下等間距依次設(shè)置,每一層所述滑槽111的正面及背面各存設(shè)有一內(nèi)箱盒2,所述內(nèi)箱盒2包括底盒21、紫外燈23及上蓋22,所述紫外燈23設(shè)于底盒21內(nèi),所述底盒21與上蓋22的一側(cè)通過(guò)合頁(yè)鉸接,所述底盒21與上蓋22的另一側(cè)通過(guò)鎖扣24扣合連接,所述底盒21上設(shè)有推拉把手25,所述底盒21的兩側(cè)分別設(shè)有與滑槽111適配的滑輪211,所述底盒21兩側(cè)的頭部分別設(shè)有與滑槽111適配的滑塊212。如圖1至圖3所示,內(nèi)箱盒2內(nèi)可存放細(xì)胞的培養(yǎng)皿,外箱體1的正面及背面均可存放內(nèi)箱盒2,正背兩面可同時(shí)存放內(nèi)箱盒2的設(shè)計(jì),提高了細(xì)胞培養(yǎng)箱的空間利用率,使得細(xì)胞培養(yǎng)箱在同一占地面積的情況下可存儲(chǔ)更多的細(xì)胞培養(yǎng)皿。存放時(shí),只需將內(nèi)箱盒2的滑輪211對(duì)準(zhǔn)滑槽111,手持在底盒21上的推拉把手25,通過(guò)滑輪211滑動(dòng)的方式,將內(nèi)箱盒2推送至滑槽111內(nèi)。人臍靜脈血管平滑肌細(xì)胞分離自臍帶組織,是臍靜脈的重要結(jié)構(gòu)之一。黑龍江裸鼠原代細(xì)胞實(shí)驗(yàn)

黑龍江裸鼠原代細(xì)胞實(shí)驗(yàn),原代細(xì)胞

原代細(xì)胞是指在機(jī)體或組織中直接從生物體分離出來(lái)的、未經(jīng)傳代培養(yǎng)的細(xì)胞。這種細(xì)胞保持著其原始的生物學(xué)特性,具有高度的活性和分裂能力。原代細(xì)胞在許多生物醫(yī)學(xué)研究中具有重要地位,包括藥物篩選、疾病模型的建立以及疫苗研發(fā)等。原代細(xì)胞的獲得通常是通過(guò)組織剪切、消化或酶解等方式從機(jī)體或組織中分離出來(lái)。這些細(xì)胞脫離了它們?cè)谏矬w中的環(huán)境,但是仍然保持著其基本的生物學(xué)特性,包括細(xì)胞膜、細(xì)胞核、細(xì)胞器以及其他重要的生物分子。原代細(xì)胞在未經(jīng)過(guò)傳代培養(yǎng)的情況下,保持著其原始的生物學(xué)特性,因此,它們常常被用于藥物篩選、毒理學(xué)研究等。同時(shí),由于原代細(xì)胞具有高度活性和分裂能力,它們也被用于組織工程和再生醫(yī)學(xué)中,如皮膚移植、骨頭修復(fù)和神經(jīng)再生等。此外,原代細(xì)胞模型在疾病研究中也扮演著重要角色。由于原代細(xì)胞具有更高的生物真實(shí)性,使用它們建立的疾病模型能夠更準(zhǔn)確地模擬疾病的發(fā)展過(guò)程和藥物的作用機(jī)制,從而為新藥研發(fā)和疾病治、療提供更有效的工具。總之,原代細(xì)胞是一種具有高度活性和分裂能力的細(xì)胞,在生物醫(yī)學(xué)研究中具有重要的作用。湖北實(shí)驗(yàn)原代細(xì)胞購(gòu)買臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞是指存在于新生兒臍帶組織中的一種多功能干細(xì)胞,它能分化成許多種組織細(xì)胞。

黑龍江裸鼠原代細(xì)胞實(shí)驗(yàn),原代細(xì)胞

限位槽410用于承載限位彈簧420,限位彈簧420用于承載固定桿430,固定桿430用于固定培養(yǎng)皿本體;請(qǐng)?jiān)俅螀㈤唸D1,一號(hào)培養(yǎng)板200和二號(hào)培養(yǎng)板300的前表面左側(cè)設(shè)置有縱向標(biāo)尺500,一號(hào)培養(yǎng)板200和二號(hào)培養(yǎng)板300的前表面左側(cè)設(shè)置有橫向標(biāo)尺510,一號(hào)培養(yǎng)板200和二號(hào)培養(yǎng)板300的頂部設(shè)置有防護(hù)蓋520,具體的,一號(hào)培養(yǎng)板200和二號(hào)培養(yǎng)板300的前表面左側(cè)粘接有縱向標(biāo)尺500,一號(hào)培養(yǎng)板200和二號(hào)培養(yǎng)板300的前表面左側(cè)粘接有橫向標(biāo)尺510,防護(hù)蓋520卡接在一號(hào)培養(yǎng)板200和二號(hào)培養(yǎng)板300的頂部,橫向標(biāo)尺510用于橫向標(biāo)記,縱向標(biāo)尺500用于縱向標(biāo)記,防護(hù)蓋520用于無(wú)菌保護(hù)。工作原理:在可以分離的細(xì)胞培養(yǎng)板使用的過(guò)程中,通過(guò)底座100、一號(hào)培養(yǎng)板200、梯形卡槽210、二號(hào)培養(yǎng)板300、梯形卡塊310和固定螺絲220的配合,實(shí)現(xiàn)了方便拆卸,且連接更加穩(wěn)定,通過(guò)橫向標(biāo)尺510和縱向標(biāo)尺500的配合,方便標(biāo)號(hào)對(duì)比,提高了效率。雖然在上文中已經(jīng)參考實(shí)施方式對(duì)本實(shí)用新型進(jìn)行了描述,然而在不脫離本實(shí)用新型的范圍的情況下,可以對(duì)其進(jìn)行各種改進(jìn)并且可以用等效物替換其中的部件。尤其是,只要不存在結(jié)構(gòu),本實(shí)用新型所披露的實(shí)施方式中的各項(xiàng)特征均可通過(guò)任意方式相互結(jié)合起來(lái)使用。

直至內(nèi)箱盒2的滑塊211與滑槽111的開(kāi)口處齊平為止,簡(jiǎn)單方便。需要說(shuō)明的是,滑槽111的正面及背面可同時(shí)存放內(nèi)箱盒2,即每一滑槽111內(nèi)可同時(shí)存放兩個(gè)內(nèi)箱盒2。所述外箱體1內(nèi)設(shè)有3列中空的矩形槽11,各所述矩形槽11的兩側(cè)分別設(shè)有15層對(duì)稱的滑槽111。即,本實(shí)用新型總共可存放90個(gè)內(nèi)箱盒2。如圖3及圖4所示,進(jìn)一步的,為方便實(shí)驗(yàn)者存取內(nèi)箱盒2,所述滑槽111的高度大于滑塊212的高度,所述滑塊212的高度大于滑輪211的直徑。本實(shí)施例中,滑槽111的高度稍大于滑塊212的高度。如此,當(dāng)內(nèi)箱盒2的正面已接近收納至滑槽111內(nèi)時(shí),滑塊212與滑槽111之間會(huì)產(chǎn)生一個(gè)移動(dòng)的阻力,導(dǎo)致內(nèi)箱盒2無(wú)法繼續(xù)順利的滑動(dòng),從而提高內(nèi)箱盒2存放的穩(wěn)定性,避免外箱體1受到顛簸,內(nèi)箱盒2就滑脫掉落。如圖5所示,為營(yíng)造無(wú)菌無(wú)毒的培養(yǎng)環(huán)境,從而提高細(xì)胞培養(yǎng)的存活率,所述內(nèi)箱盒2包括底盒21、紫外燈23及上蓋22。所述紫外燈23設(shè)于底盒21內(nèi),所述底盒21與上蓋22的一側(cè)通過(guò)合頁(yè)鉸接,所述底盒21與上蓋22的另一側(cè)通過(guò)鎖扣24扣合連接。紫外燈23具有殺菌消毒的作用,在每一內(nèi)箱盒2內(nèi)設(shè)有一紫外燈23,可為細(xì)菌培養(yǎng)皿單獨(dú)提供一個(gè)無(wú)菌無(wú)毒的培養(yǎng)環(huán)境,提高培養(yǎng)細(xì)胞的存活率。而鎖扣24的設(shè)置。采用波形蛋白(Vimentin)免疫熒光染色鑒定,結(jié)果顯示波形蛋白(Vimentin)免疫熒光染色鑒定呈現(xiàn)陽(yáng)性。

黑龍江裸鼠原代細(xì)胞實(shí)驗(yàn),原代細(xì)胞

1)將一管細(xì)胞從液氮罐中取出,注意保護(hù)手和眼睛。(2)將凍存管快速的放入37℃水浴中,輕輕握住并旋轉(zhuǎn),直到管內(nèi)物體完全融化。(3)將凍存管立即從水浴中拿出,擦干,轉(zhuǎn)入無(wú)菌環(huán)境。(4)用70%的酒精沖洗凍存管,然后擦去多余酒精。(5)打開(kāi)蓋子,注意手指不要碰到里面的螺紋(注意,由于凍存管有負(fù)壓,開(kāi)蓋時(shí)可能會(huì)有少量溢出,這是正常現(xiàn)象)。(6)用多聚賴氨酸(或參照說(shuō)明書(shū))包被培養(yǎng)瓶。多數(shù)細(xì)胞推薦的接種密度為每平方厘米5000個(gè)細(xì)胞。(7)蓋好培養(yǎng)瓶的蓋子,輕輕搖晃培養(yǎng)瓶以使細(xì)胞分布均勻。若需要?dú)怏w交換可打開(kāi)蓋子。(8)將培養(yǎng)瓶放入培養(yǎng)箱中(37℃,5%CO2,95%空氣)(9)放入培養(yǎng)箱后第6-16小時(shí)更換一次培養(yǎng)基,以去除殘留的二甲基亞楓和未貼壁的細(xì)胞。5、細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中,多久更換一次培養(yǎng)基?這取決于細(xì)胞生長(zhǎng)的速度。一般而言2-3天更換一次培養(yǎng)基,許多細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室通常在周一,周三,周五更換培養(yǎng)基。注意:凍存細(xì)胞復(fù)蘇后,在6-16小時(shí)內(nèi)更換培養(yǎng)基,以去除殘留的二甲基亞楓和死亡的細(xì)胞。6、我能擴(kuò)增培養(yǎng)和再次凍存原代正常人類細(xì)胞嗎?這取決于細(xì)胞的類型。一些細(xì)胞類型像神經(jīng)細(xì)胞,神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞和一些生長(zhǎng)緩慢的上皮細(xì)胞,不推薦擴(kuò)增培養(yǎng)和再次凍存。本公司生產(chǎn)的SD大鼠心肌成纖維細(xì)胞采用混合酶消化、密度梯度離心制備而來(lái)。乳鼠原代細(xì)胞分離

為了后續(xù)實(shí)驗(yàn)成功進(jìn)行,我們對(duì)分離培養(yǎng)的細(xì)胞做一個(gè)細(xì)胞鑒定實(shí)驗(yàn)。黑龍江裸鼠原代細(xì)胞實(shí)驗(yàn)

充分去除組織表面的血漬和其它異物。2、將組織轉(zhuǎn)入另一無(wú)菌的培養(yǎng)皿,切去多余組織如脂肪或壞死組織,用無(wú)菌刀將組織切成1mm3小塊。3、用無(wú)菌彎頭鑷將組織塊轉(zhuǎn)入50ml的無(wú)菌離心管中,讓組織塊沉淀,吸去多余液體,加入10mlbuffera,充分混勻,300g離心5分鐘,棄上清,如此重復(fù)操作3次。4、用10mlbufferb重懸組織塊,將組織塊懸液轉(zhuǎn)移至25cm2無(wú)菌培養(yǎng)瓶中,放置co2培養(yǎng)箱中,37℃培養(yǎng)24小時(shí)。5用強(qiáng)力吹打使組織分散,將懸液移入15ml無(wú)菌離心管,500g離心5分鐘,棄上清。6、取10mlbufferc懸浮組織塊,置于37℃水浴中30分鐘,每10分鐘搖動(dòng)一次,讓組織塊沉淀。7、取上清放入50ml離心管中,加入1mlbufferd,終止反應(yīng)。8、重復(fù)步驟6、7兩次。9、將吸出全部上清進(jìn)行離心,500g離心5分鐘,棄上清。10、取2mlbuffere懸浮細(xì)胞,用血球計(jì)數(shù)板或電子記數(shù)儀計(jì)數(shù)細(xì)胞,并檢測(cè)細(xì)胞活性。11、懸浮細(xì)胞用相應(yīng)的原代細(xì)胞培養(yǎng)基稀釋,使每毫升培養(yǎng)基中含有1×106個(gè)細(xì)胞,接種培養(yǎng)瓶中,大約每平方厘米2×105個(gè)細(xì)胞。12、每隔2-4天更換一次培養(yǎng)基(以ph變化為標(biāo)準(zhǔn)),觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況。黑龍江裸鼠原代細(xì)胞實(shí)驗(yàn)

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