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來源: 發(fā)布時間:2020-10-19

分離純化多肽的常用方法-高效液相色譜(HPLC) HPLC 的出現(xiàn)為肽類物質(zhì)的分離提供了有利的方法手段,因?yàn)榈鞍踪|(zhì)、多肽的HPLC 應(yīng)用與其它化合物相比,在適宜的色譜條件下不僅可以在短時間內(nèi)完成分離目的,更重要的是HPLC 能在制備規(guī)模上生產(chǎn)具有生物活性的多肽。因此在尋找多肽類物質(zhì)分離制備的比較好條件上,不少學(xué)者做了大量的工作。如何保持多肽活性、如何選擇固定相材料、洗脫液種類、如何分析測定都是目前研究的內(nèi)容。海博納新材料科技(蘇州)有限公司歡迎來電銷售多肽分離填料哪家強(qiáng)

多肽是α-氨基酸以肽鍵連接在一起而形成的化合物,是蛋白質(zhì)水解的中間產(chǎn)物。由兩個氨基酸分子脫水縮合而成的化合物叫做二肽,同理類推還有三肽、四肽、五肽等。通常由10~100個氨基酸分子脫水縮合而成的化合物叫多肽。 肽(peptide)是α-氨基酸以肽鍵連接在一起而形成的化合物,它也是蛋白質(zhì)水解的中間產(chǎn)物。 一般肽中含有的氨基酸的數(shù)目為二到九,根據(jù)肽中氨基酸的數(shù)量的不同,肽有多種不同的稱呼:由兩個氨基酸分子脫水縮合而成的化合物叫做二肽,同理類推還有三肽、四肽、五肽等,一直到九肽。通常由10~100個氨基酸分子脫水縮合而成的化合物叫多肽,它們的分子量低于10,000Da(Dalton,道爾頓),能透過半透膜,不被三氯乙酸所沉淀。也有文獻(xiàn)把由2~10個氨基酸組成的肽稱為寡肽(小分子肽);10~50個氨基酸組成的肽稱為多肽;由50個以上的氨基酸組成的肽就稱為蛋白質(zhì),換言之,蛋白質(zhì)有時也被稱為多肽。多肽也簡稱為肽,是20世紀(jì)被發(fā)現(xiàn)的。廣州口碑好多肽分離填料

分離純化多肽的常用方法-膜蛋白色譜 CMP+分離強(qiáng)蔬水性蛋白、多肽混合物的層析系統(tǒng),一般有去垢劑(如SDS)溶解膜蛋白后形成SDS-融膜蛋白,并由羥基磷灰石為固定相的柱子分離純化。羥基磷灰石柱具有陰離子磷酸基團(tuán)(P-端),又具有陽離子鈣(C-端),與固定相結(jié)合主要決定于膜蛋白的大小、SDS 結(jié)合量有關(guān)。利用原子散射法研究cAMP的分離機(jī)制發(fā)現(xiàn),樣品與SDS 結(jié)合后在離子交換柱上存在SDS 分子、帶電荷氨基酸與固定相中帶電離子間的交換,從而達(dá)到分級分離的目的。

分離純化多肽的常用方法-置換色譜 HPDC 是利用小分子置換劑來交換色譜柱上的樣品,從而達(dá)到分離的目的。它具有分離組分含量較少成分的特性。利用HPDC 鑒定分離了低于總量1% 組分的活性人重組生長(rHG )。在研究非毒**換劑時Jayarama 發(fā)現(xiàn)化葡萄糖(Detran Sulfate,DS)是對β 乳球蛋白A 和B 的良好置換劑,一般DS 的相對分子質(zhì)量為1×104 和4×104 **宜。研究表明置換劑的相對分子質(zhì)量越低,越易于與固定相結(jié)合,因此在分離相對分子質(zhì)量小的多肽時,需要更小的置換劑才能將其置換純化出來。

分離純化多肽的常用方法 分離方法 采取何種分離純化方法要由所提取的組織材料、所要提取物質(zhì)的性質(zhì)決定。對蛋白質(zhì)、多肽提取分離常用的方法包括:鹽析法、超濾法、凝膠過濾法、等電點(diǎn)沉淀法、離子交換層析、親和層析、吸附層析、逆流分溶、酶解法等。這些方法常常組合到一起對特定的物質(zhì)進(jìn)行分離純化,同時上述這些方法也是蛋白、多肽類物質(zhì)分析中常用的手段,如層析、叫泳等。 核磁共振,基質(zhì)輔助激光解析/ 離子化-飛行時間質(zhì)譜, 電霧離子化質(zhì)譜,連續(xù)流快原子轟擊質(zhì)譜,質(zhì)譜分析除上述方法之外,氨基酸組成分析、氨基酸序列分析、場解析質(zhì)譜、IR、UV 光譜、CD、圓而色譜、生物鑒定法、放射性同位素標(biāo)記法及免疫學(xué)方法等都已應(yīng)用于多肽類物質(zhì)的結(jié)果鑒定、分析檢測之中。銷售多肽分離填料哪家強(qiáng)

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分離純化多肽的常用方法-疏水作用色譜 HIC 是利用多肽中含有疏水基因,可與固定相之間產(chǎn)生疏水作用而達(dá)到分離分析的目的,其比RP-GPLC 具有較少使多肽變性的特點(diǎn)。利用GIC 分離生產(chǎn)(GH)產(chǎn)品的結(jié)構(gòu)與活性比EP-GPLC 分離的要穩(wěn)定,活性較穩(wěn)定。Geng 等利用HIC 柱的低變性特點(diǎn),將大腸桿菌表達(dá)出的經(jīng)鹽酸胍乙啶變性得到人重組干擾素-γ。通過HIC 柱純化、折疊出高生物活性的產(chǎn)品。不同人尿表皮生長因子(EGF)也利用HIC 純化到了,均具有良好的生物活性。HIC 可將未經(jīng)離子交換柱的樣品純化。而RP-HPLC 則不能達(dá)到這一要求。銷售多肽分離填料哪家強(qiáng)

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