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來(lái)源: 發(fā)布時(shí)間:2020-02-08

分離純化多肽的常用方法-置換色譜 HPDC 是利用小分子置換劑來(lái)交換色譜柱上的樣品,從而達(dá)到分離的目的。它具有分離組分含量較少成分的特性。利用HPDC 鑒定分離了低于總量1% 組分的活性人重組生長(zhǎng)(rHG )。在研究非毒**換劑時(shí)Jayarama 發(fā)現(xiàn)化葡萄糖(Detran Sulfate,DS)是對(duì)β 乳球蛋白A 和B 的良好置換劑,一般DS 的相對(duì)分子質(zhì)量為1×104 和4×104 **宜。研究表明置換劑的相對(duì)分子質(zhì)量越低,越易于與固定相結(jié)合,因此在分離相對(duì)分子質(zhì)量小的多肽時(shí),需要更小的置換劑才能將其置換純化出來(lái)。杭州口碑好多肽分離填料

分離純化多肽的常用方法-反相高效液相色譜 結(jié)果與保留值之間的關(guān)系:利用RP-HPLC 分離多肽首先得確定不同結(jié)構(gòu)的多肽在柱上的保留情況。為了獲得一系列的保留系數(shù),Wilce 等利用多線性回歸方法對(duì)2106 種肽的保留性質(zhì)與結(jié)構(gòu)進(jìn)行分析,得出了不同氨基酸組成對(duì)保留系數(shù)影響的關(guān)系,其中極性氨基酸殘基在2~20 氨基酸組成的肽中,可減少在柱上的保留時(shí)間;在10~60 氨基酸組成的肽中,非極性氨基酸較多也可減少在柱上的保留時(shí)間,而含5~25 個(gè)氨基酸的小肽中,非極性氨基酸增加可延長(zhǎng)在柱上的保留時(shí)間。 同時(shí)有不少文獻(xiàn)報(bào)道了肽鏈長(zhǎng)度、氨基酸組成、溫度等條件對(duì)保留情況的影響,并利用計(jì)算機(jī)處理分析得到每種多肽的分離提取的比較好條件。 肽圖分析(Peptide Mapping):肽圖分析是根據(jù)蛋白質(zhì)、多肽的分子量大小以及氨基酸組成特點(diǎn),使用專一性較強(qiáng)的蛋白水解酶[ 一般未肽鏈內(nèi)切酶(endopeptidase)]作用于特殊的肽鏈位點(diǎn)將多肽裂解成小片斷,通過(guò)一定的分離檢測(cè)手段形成特征性指紋圖譜,肽圖分析對(duì)多肽結(jié)構(gòu)研究合特性鑒別具有重要意義。 長(zhǎng)沙直銷多肽分離填料

分離純化多肽的常用方法 分離方法 采取何種分離純化方法要由所提取的組織材料、所要提取物質(zhì)的性質(zhì)決定。對(duì)蛋白質(zhì)、多肽提取分離常用的方法包括:鹽析法、超濾法、凝膠過(guò)濾法、等電點(diǎn)沉淀法、離子交換層析、親和層析、吸附層析、逆流分溶、酶解法等。這些方法常常組合到一起對(duì)特定的物質(zhì)進(jìn)行分離純化,同時(shí)上述這些方法也是蛋白、多肽類物質(zhì)分析中常用的手段,如層析、叫泳等。 核磁共振,基質(zhì)輔助激光解析/ 離子化-飛行時(shí)間質(zhì)譜, 電霧離子化質(zhì)譜,連續(xù)流快原子轟擊質(zhì)譜,質(zhì)譜分析除上述方法之外,氨基酸組成分析、氨基酸序列分析、場(chǎng)解析質(zhì)譜、IR、UV 光譜、CD、圓而色譜、生物鑒定法、放射性同位素標(biāo)記法及免疫學(xué)方法等都已應(yīng)用于多肽類物質(zhì)的結(jié)果鑒定、分析檢測(cè)之中。

分離純化多肽的常用方法-高效液相色譜(HPLC) HPLC 的出現(xiàn)為肽類物質(zhì)的分離提供了有利的方法手段,因?yàn)榈鞍踪|(zhì)、多肽的HPLC 應(yīng)用與其它化合物相比,在適宜的色譜條件下不僅可以在短時(shí)間內(nèi)完成分離目的,更重要的是HPLC 能在制備規(guī)模上生產(chǎn)具有生物活性的多肽。因此在尋找多肽類物質(zhì)分離制備的比較好條件上,不少學(xué)者做了大量的工作。如何保持多肽活性、如何選擇固定相材料、洗脫液種類、如何分析測(cè)定都是目前研究的內(nèi)容。海博納新材料科技(蘇州)有限公司歡迎來(lái)電

分離純化多肽的常用方法-分子排阻色譜 SEC 是利用多肽分子大小、形狀差異來(lái)分離純化多肽物質(zhì),特別對(duì)一些較大的聚集態(tài)的分子更為方便,如人重組生長(zhǎng)(hgH)的分離,不同結(jié)構(gòu)、構(gòu)型的GH 在SEC 柱上分離行為完全不同,從而可分離不同構(gòu)型或在氨基酸序列上有微小差異的變異體,利用SEC 研究修飾化的PEG 的分離方法,此PEC 具有半衰期長(zhǎng)、作用強(qiáng)的特點(diǎn)。一些分子量較大的肽或蛋白均可利用此法分離分析。 分離純化多肽的常用方法--離子交換色譜 IEXC 可在中性條件下,利用多肽的帶電性不同分離純化具有生物活性的多肽。其可分為陽(yáng)離子柱與陰離子柱兩大類,還有一些新型樹脂,如大孔型樹脂、均孔型樹脂、離子交換纖維素、葡聚糖凝膠、瓊脂糖凝膠樹脂等。在多肽類物質(zhì)的分離分析研究中,對(duì)多肽的性質(zhì)、洗脫劑、洗脫條件的研究較多,不同的多肽分離條件有所不同,特別是洗脫劑的離子強(qiáng)度、鹽濃度等對(duì)純化影響較大。Wu 等報(bào)道利用離子交換柱層析法,探討分離牛碳酸酐異構(gòu)體和牛血清白蛋白、雞血清白蛋白酶的提取條件,獲得了有價(jià)值的數(shù)據(jù)供今后此類物質(zhì)分離研究。深圳多肽分離填料哪家好

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分離純化多肽的常用方法-疏水作用色譜 HIC 是利用多肽中含有疏水基因,可與固定相之間產(chǎn)生疏水作用而達(dá)到分離分析的目的,其比RP-GPLC 具有較少使多肽變性的特點(diǎn)。利用GIC 分離生產(chǎn)(GH)產(chǎn)品的結(jié)構(gòu)與活性比EP-GPLC 分離的要穩(wěn)定,活性較穩(wěn)定。Geng 等利用HIC 柱的低變性特點(diǎn),將大腸桿菌表達(dá)出的經(jīng)鹽酸胍乙啶變性得到人重組干擾素-γ。通過(guò)HIC 柱純化、折疊出高生物活性的產(chǎn)品。不同人尿表皮生長(zhǎng)因子(EGF)也利用HIC 純化到了,均具有良好的生物活性。HIC 可將未經(jīng)離子交換柱的樣品純化。而RP-HPLC 則不能達(dá)到這一要求。杭州口碑好多肽分離填料

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