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寧夏乳鼠動物模型實驗

來源: 發布時間:2024-02-06

    四氯化碳誘導急性肝損傷大鼠模型【方法】1、將大鼠隨機分配至2組中,每組5只,正常喂食喂水7d后進行試驗;2、大鼠體重為200g±10g,按組別給予藥物:生理鹽水組每只腹腔注射1ml生理鹽水、模型組每只按5ml/kg背部皮下注射四氯化碳3、各組藥物注射24h后取材進行相關檢測(注:注射前按比例混合四氯化碳:橄欖油=1:)【評定】給予四氯化碳后TP含量下降,ALT和AST含量上升【檢測】生理鹽水組肝索結構清晰,血管內無淤血,血管周圍無炎癥病灶,肝小葉結構清晰;給予四氯化碳后肝索排列紊亂,結構不清,存在大量壞死區域且肝索結構消失,有大小不一的空泡結構,多數血管內有淤血并伴有粉染蛋白樣物質,血管周圍有炎癥反應灶,少量紅細胞滲出;西維來司鈉介入后肝索排列不清晰,存在部分壞死區域且肝索結構消失,有大小不一的空泡結構,少數血管內有淤血并伴有粉染蛋白樣物質,血管周圍有炎癥反應灶,極少量紅細胞滲出。動物模型的優越性主要表現在以下幾下方面。寧夏乳鼠動物模型實驗

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    根據gm20541的cdna序列設計引物:gm20541-cdna-f:5’-tcggtctcatcttcattccc-3';gm20541-cdna-r:5’-ggaaggctctgttccggtat-3';(g)以提取的cdna為模板,進行rt-pcr。擴增后進行電泳。結果見圖4中b,可以看出,通過rt-pcr方法檢測gm20541在gm20541基因敲除純合子小鼠的視網膜中表達量降低。圖4的b中ctrl是指野生型對照,sixko是指gm20541基因敲除純合子小鼠;gm20541rnalevel是指rna表達水平相對變化,以野生型表達水平為1。實施例3對4月齡的gm20541基因敲除純合子小鼠進行erg視力檢測:1暗適應動物應整夜暗適應,環境應做到沒有光線;2次日麻醉:稱重,腹腔內注射;宜深度麻醉;3動物固定及散瞳:麻醉完成后,在暗紅光照明下將小鼠用膠帶固定在動物試驗平臺的前方:需保證小鼠正"趴",即相對于閃光刺激器的刺激口,雙眼高度一致,充分暴露,滴加散瞳劑。4電極安裝:將視網膜電圖儀(espionvisualelectrophysiologysystem,diagnosysllc,littleton,ma,usa)預熱后,在耳夾電極涂上導電膏,夾尾巴,插入放大器“地”接口;雙頭的針電極插入后頸皮(大約在兩耳中間),同時接兩個通道的“負”接口;金環電極夾在動物實驗平臺的電極支架上,仔細調整其角度。裸鼠動物模型實驗IgA腎病小鼠模型IgA 腎病是常見的原發性腎小球疾病,約占原發性腎小球疾病的 1/3。

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    應根據所檢測指標的要求,需采取不同策略處理。在如今分子生物學當道的現實背景下,動物實驗除了對實驗動物的體征及生理指標進行的監控外,各種分子檢測甚至是組學檢測也開始大行其道,動物實驗結束之后的機制研究成為了實驗的重頭戲。一般來說,動物實驗檢測對象主要包括:(1)體液中各類因子定性及定量檢測由于此類檢測對象多為蛋白及各類小分子物質,因此在取樣過程中應注意防止此類物質降解,在獲取后,應及時置于溫(≤-80℃)進行保存,在后續實驗過程中,也應當注意保存條件的穩定性,避免反復凍融。常用的方法便是酶聯免疫吸附測定(ELISA),除此之外,可利用生化分析儀及不同檢測方法的試劑盒(比色法、比濁法等)方法對各類生化指標及因子進行定性及定量檢測。(2)組織病理、生理變化及免疫組化檢測常用的病理檢測多使用H&E染色對細胞質及細胞核進行染色標記,以觀察細胞變化。除此之外,許多特殊染色也在病理生理變化中得到了應用,如利用Masson染色檢測組織纖維化病變,Nissl染色檢測神經元損傷,β-半乳糖甘酶染色檢測細胞衰老等。此外,還可以通過免疫組化技術對某些特異性標記物進行免疫顯色檢測,達到原位定性或定量檢測的目的。。

    再向老師、師兄師姐學習經驗和技術,如果實驗平臺的儀器需要提前預約,建議提前規劃好使用的時間。反復總結尋找答案在整個預實驗的過程中可能會出現很多問題。比如造模效果欠佳、灌胃操作不當、腹腔注射操作失誤、物使用不當等引起動物死亡。每遇到問題都需要自己想辦法解決,可以從導師、師兄師姐、文獻、貼吧、視頻教程等找到答案。比如筆者曾遇到同樣的物給藥,發現有的大鼠麻醉得很深,有的大鼠還活蹦亂跳,在反復嘗試調整濃度,給藥劑量,更換麻醉方式,后來才發現是動物體重秤的準度有問題,導致體重秤得不準。因此,需要自己反復琢磨到底是實驗過程中哪一個環節出現問題,逐一排除。也要求在每一個實驗步驟需要標準化,統一化,盡可能的排除干擾因素,這樣方便在遇到問題快的找到答案。同時,建議每日總結,大到動物死亡原因分析,小到灌胃操作耗時多長時間。建議反復總結出每天實驗的優缺點。做任何一個操作之前,建議提前腦海中反復模擬,準備好相關工具和試劑,避免臨用之際缺少藥的,影響實驗操作節奏和個人心情。筆者曾經灌胃操作的時候發現藥物竟然忘帶了,只好重新回實驗室準備,那真叫一個郁悶。仔細記錄每日實驗過程無論是碩士還是博士。好的動物模型能夠較好地模擬疾病狀態,為的研究提供可能。

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    脂多糖致膿毒血癥肝損傷小鼠模型【方法】1、小鼠稱重,按體重計算藥物用量。2、脂多糖(LPS)藥物配制,生理鹽水溶解,根據小鼠體重配制終濃度為10mg/kg,200ul/只腹腔注射使用。3、抓取小鼠,捏緊小鼠頸背部皮膚,小拇指無名指疊加固定小鼠左下肢充分暴露小鼠腹部。4、小鼠的頭部向下,這樣腹腔中的就會自然倒向胸部,防止注射器刺入時損傷腸道。進針的動作要輕乘,防止刺傷腹部。5、注射器吸取準備好的藥物,腹腔左下部與身體呈45度角左右斜角進針注射LPS,注射完藥物后,輕微旋轉針頭退針,防止漏液。6、造模18h后處死小鼠解剖取組織進行組織病理學檢查。【檢測】肝組織有無:1、肝水腫;2、肝出血;3、炎性細胞浸潤;4、肝組織腫大等病理改變。再觀察肝損傷程度,各按程度積分為:0分為無該項病理改變;1分為病理變化輕且很局限;2分為病理變化中等且局限;3分為病變中等但或局部很;4分為非常的理改變。求出各動物的各項病理改變的總和,作為肝損傷程度積分。大腦中動脈(MCA)為臨床上發生腦缺血損傷常見的部位之一。湖北C57動物模型手術

大鼠、小鼠動物疾病模型技術。寧夏乳鼠動物模型實驗

    所述外顯子序列為第3外顯子序列。進一步地,在本發明的一些實施方案中,利用cre-loxp基因敲除技術敲除gm20541基因上的第3外顯子序列。上述敲除策略是采用cre-loxp敲除技術敲除gm20541基因。但在其他的實施例中,實現基因敲除的技術手段有很多,例如crispr/cas9技術、人工核酸酶介導的鋅指核酸酶技術(zinc-fingernucleases,zfn)、轉錄因子樣效應物核酸酶技術(transceriptionactivator-likeeffectornucleases,talen)等。因此,在其他的實施例中采用crispr/cas9技術或其他的技術手段敲除gm20541基因,也是屬于本發明的保護范圍。進一步地,在本發明的一些實施方案中,所述目標動物為哺乳動物。進一步地,在本發明的一些實施方案中,所述哺乳動物選自小鼠、大鼠、狗、豬、猴以及猿中的任意一種。需要說明是,本發明所述的目標動物并不限于上述的動物,其他類型的哺乳動物也是可行,無論選用何種動物,只要是具有gm20541基因或其同源基因的動物,均可作為本發明所述構建方法中的目標動物,在其前體細胞中敲除gm20541基因,使其表現出視網膜色素變性性疾病特征,作為視網膜色素變性疾病模型,這也是屬于本發明的保護范圍。第二方面。寧夏乳鼠動物模型實驗

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