熒光壽命成像的原理：如果分子環境刺激激發態衰變而不發射光子，則熒光強度會降低（淬滅）。熒光淬滅是一條單獨的發射路徑，因此在動力學上與熒光過程形成競爭關系。激發態存儲現在可以通過一個以上的過程衰變，從而縮短熒光壽命。這種壽命的改變可用于收集分子環境的信息。一種特殊類型的淬滅是將激發能量以非輻射的方式傳遞到相鄰的不同熒光染料中：“熒光共振能量轉移”，FRET。此時，不只第1個熒光染料（供體）變暗，壽命變短，而且第二個熒光染料（受體）在“錯誤的”激發顏色下開始發光。由于這種效果的產生需要兩種熒光染料（小于10 nm）的密切接觸，因此將其用作研究分子相互作用的“分子標尺”。熒光成像在疾病診斷，藥物分布和代謝評估以及血管生物成像中得到了普遍的應用。福建動物熒光壽命成像原理
熒光壽命成像可以干什么？熒光壽命成像圖像中每一個像素點在phasor圖上都有一個對應的點。因此我們可以獲取每個像素點的壽命信息，也可以獲知每一壽命所對應的圖像區域。熒光壽命成像可以提供熒光強度（光子數）和光子壽命的空間分布，具有200 nm的空間分辨率和皮秒量級的時間分辨率。通過雙光子激發（結合飛秒脈沖和共焦顯微鏡）可以直接檢測熒光和時間分辨的熒光壽命。這種無損檢測技術，無需解剖或專門制造分層樣品，不但可在樣品表面，還可在樣品表面以下實現深度解析測量。特別適用于新材料、光子學、光伏、光催化、生物材料、納米材料和納米復合材料以及其相關的原理探究和設計優化。福建動物熒光壽命成像原理熒光壽命成像可用于多種生物應用，包括組織表面掃描、組織類型繪圖、光動力治理、DNA芯片分析等。
熒光壽命成像如何理解？熒光壽命成像主要通過TCSPC技術（Time-Correlated Single Photon Counting）實現。系統采用超短脈寬激光器作為激發光源，通過光路耦合器，將激光引入顯微光路。激光通過物鏡聚焦照射樣品池，利用光子探測裝置（PMT）對熒光信號進行探測，再用TCSPC計數器對每一個光子進行計數，并將其放入一個對應的時間窗口，經過一定時間的統計疊加后即得到熒光壽命曲線。幾十萬次重復以后，不同的時間通道累積下來的光子數目不同。以光子數對時間作圖可得到熒光衰減曲線。實現從百ps-ns-us的瞬態測試。綜上所述由于TCSPC系統，一個激光脈沖只采集一個光子信號，所以激光器的重復頻率決定了系統的數據采集速度。重頻越高，采集速度越快，數據信噪比越好。
紅外熒光壽命成像技術在生物多重檢測中的應用。相比于熒光強度，熒光壽命的數值具有很好的穩定性，不依賴于生物組織穿透深度。因此可以實現生物多重成像和量化診斷。該團隊利用能量延遲方法并結合對發光離子濃度的調控，實現NIR-II區單一波長下熒光壽命三個量級以上的精確調節。將這種成像方法應用于乳腺的精確診斷，其對標志物的定量檢測結果與傳統的免疫印跡法和免疫組織化學法相比有很好的一致性。而相比于后兩者一次只能對一種標志物進行檢測，這種新的時間維度成像方法可以原位實現同時定量多個標記物，并且減少了傳統檢測方法在組織切片的制作、處理以及評分過程中所導致結果的差異性。熒光壽命成像(FLIM)可用于測量分子環境參數，通過熒光共振能量轉移進行的蛋白質相互作用。
熒光壽命成像技術能夠實時監控納米顆粒在細胞內的穩定性。FLIM不但具有其它熒光顯微鏡所具有的高靈敏度、可檢測生物生物樣品等優點，它在監控熒光納米材料的穩定性上還具有以下幾個優勢：（1）熒光壽命不受熒光探針的濃度的影響，可排除納米材料的胞吐及細胞分化導致的納米顆粒的稀釋等對測量的影響；（2）很多常見的發光材料的熒光壽命都遠遠大于細胞的自熒光的壽命，很易去除生物自熒光對熒光成像的干擾；（3）發光材料的熒光壽命和其材料的穩定性密切相關，熒光壽命的改變可以靈敏地反映相應材料的化學穩定性。基于上述原理，他們利用FLIM技術系統考察了半導體量子點和金納米簇在活的細胞（HeLa）里72小時內的穩定性，以及不同的表面配體對這一過程的影響。熒光壽命顯微成像技術具有對生物大分子結構、動力學信息和分子環境等進行高分辨高精度測量的能力。吉林紅外熒光壽命成像報價
熒光壽命成像不但可在樣品表面，還可在樣品表面以下實現深度解析測量。福建動物熒光壽命成像原理
熒光壽命成像FLIM所面臨的挑戰：在數據處理上，由于曲線擬合迭代過程的需求，計算成本較其他成像方案更高。在成像原理上，熒光壽命受多種外界因素影響，這些因素包括分子相互作用、pH值、溫度和粘滯阻力等，很難對這些參數控制變量，使得測量熒光壽命存在交叉干擾問題。此外，與普通光學顯微技術類似，介質光散射影響成像信噪比及空間分辨率，成像深度受到限制。FLIM已經在系統裝置、熒光探針和數據處理算法等方面得到了較快的發展，這也使得熒光壽命成像FLIM在對細胞微環境成像和生物代謝監測發揮出不可替代的作用。福建動物熒光壽命成像原理
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