熒光壽命成像有幾點優勢：1.不需要考慮跳色的影響，從而免去了計算和去除跳色雜質信號的麻煩；去除跳色雜質的準確性很大程度上依賴于信噪比、成像流程的設計和控制、以及跳色信號估算的算法，這些因素使得通過穩態光強度測量熒光壽命成像的精確度在很多時候受到質疑。2.穩態光強度的熒光壽命成像測量很容易受熒光標記光漂白或是激發光散射背景的影響,而這些因素對FLIM-FRET的測量影響相對較低。3.熒光壽命成像可以定量的區分參與FRET和沒有參與FRET的分子數量，這樣深入的定量分析是穩態光強度方法做不到的。熒光壽命成像具有200 nm的空間分辨率和皮秒量級的時間分辨率。佛山動物熒光壽命成像哪里有

熒光壽命成像裝置通常由激發光源、光電探測器、延遲儀器及圖像處理設備組成。門控儀器的光源通常為短脈沖的超快激光器，常見的成像設備是CCD，延遲儀器提供FLIM的控制信號。由于光電探測器和CCD等器件輸出的是光強度信息，熒光壽命圖像可以通過Rapid Lifetime Determination （RLD）和Weighted Nonlinear Least Square （WNLLS）兩種處理方法利用熒光強度圖像通過反演得出。熒光壽命成像（FLIM）有時域和頻域測量法，時域測量中主要有TCSPC技術、門控探測技術、條紋相機探測技術和頻閃技術；頻域測量法中主要是調制技術。每一種測量技術在測量樣品成像的過程中都有優勢和劣勢，在實際測量樣品的熒光壽命時，需要根據實際的樣品裝填而綜合考慮選擇合適的熒光壽命測量技術。佛山動物熒光壽命成像哪里有熒光壽命成像（FLIM）對細胞信號傳導及調控，蛋白間的相互作用等生物研究發揮著很大作用。

熒光壽命成像技術（Fluorescence Lifetime ImagingMicroscopy，FLIM）是一種在顯微尺度下展現熒光壽命空間分布的技術，由于其不受樣品濃度影響，具有其他熒光成像技術無法代替的優異性能，目前在生物醫學工程、光電半導體材料等領域是一種重要的表征測量手段。熒光和熒光壽命：分子包含多個單能態S0、S1、S2…和三重態T1…，每個能態都包含多個精細的能級。正常情況下，大部分電子處在*低能態即基態S0 的*低能級上，當分子被光束照射，會吸收光子能量，電子被激發到更高的能態S1 或S2 上，在S2 能態上的電子只能存在很短暫的時間，便會通過內轉換過程躍遷到S1 上，而S1 能態上的電子亦會在極短時間內躍遷到S1 的*低能級上，而這些電子會存在一段時間后通過震蕩弛豫輻射躍遷到基態，這個過程會釋放一個光子，即熒光。此外，亦會有電子躍遷至三重態T1 上，再由T1 躍遷至基態，我們稱之為磷光。

熒光壽命成像是一種新型的熒光成像技術，它能夠對不同種類或處于不同狀態的生物組織提供更好的對比度，并反映熒光團及其所處微環境參數的定量分布。熒光壽命成像一般不受諸如激光或熒光強度擾動、熒光染料分布不均勻、染料的光漂白以及其他有礙熒光強度的因素的影響,是熒光光譜分析法的有效補充。超快激光技術，高速、高靈敏度探測技術，以及圖像處理技術的發展，都促進了FLIM 技術的發展．尤其是將熒光壽命成像和共焦顯微技術以及多光子激發熒光顯微技術結合，進一步拓寬了FLIM在生物學領域的應用范圍。測量熒光壽命需要極快響應時間的探測器。

熒光壽命成像技術及其在生物醫學中的應用：熒光分子的壽命就像熒光分子的激發光譜和發射光譜一樣是熒光分子的固有特性，隨著近年來對蛋白及分子功能研究的不斷深入，科研工作者除對多色成像、鈣成像等功能成像的需求日漸增多之外，對熒光壽命成像的需求也逐漸增加，而熒光壽命成像能提供除熒光強度、熒光光譜信息之外的熒光分子的壽命信息，可用于分子間相互作用（FRET）、分子所處微環境的離子濃度（如Ca2+、pH）及細胞代謝水平的改變等測量，并可拆分光譜重疊的熒光染料及染料和自發熒光，還可以結合熒光相關光譜對單分子實現熒光壽命相關光譜FLCS的測量。熒光壽命成像擴展了傳統熒光成像的維度，是功能成像的理想工具，在生物醫學領域有廣闊的應用前景。熒光壽命(FLT)是熒光團在發射光子并返回基態之前花費在激發態的時間。北京植物熒光壽命成像價錢

熒光壽命取決于熒光分子所處的微環境，通過對樣品熒光壽命的測量和成像可以定量獲取樣品的功能信息。佛山動物熒光壽命成像哪里有

熒光壽命可以在頻域或者時間域測量。時間域測量方法涉及用短光脈沖照射樣品（比色皿、細胞或組織），然后隨時間測量發射強度。FLT由衰減曲線的斜率確定。有幾種熒光檢測方法可用于壽命測量，其中時間相關單光子計數（TCSPC）可實現簡單的數據收集和增強的定量光子計數。頻域方法涉及高頻率入射光的正弦調制。在該方法中，發射發生在與入射光相同的頻率處，并且隨著激發光兼有相位延遲和振幅的變化（解調）。壽命測量不需要波長比率探針來提供眾多分析物的定量測定。壽命法通過使用光譜位移探針擴展了分析物濃度范圍的靈敏度。壽命測量可用于沒有直接探針的分析物。包括葡萄糖、抗原或基于熒光能量轉移轉導機制的任何親和力或免疫測定。佛山動物熒光壽命成像哪里有

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